NIBSC 154脊髓灰質(zhì)炎病毒2型MAPREC分析

產(chǎn)品時(shí)間：2022-03-04

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NIBSC 97/756 脊髓灰質(zhì)炎病毒2型MAPREC分析（標(biāo)準(zhǔn)品）旨在用作對(duì)照以確定個(gè)體測(cè)定在 MAPREC 測(cè)定中是否有效。每個(gè)檢測(cè)還應(yīng)包括一個(gè)高病毒對(duì)照，編碼為 98/596，以及國(guó)際標(biāo)準(zhǔn) 97/758

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世界衛(wèi)生組織參考試劑

第一個(gè)國(guó)際參考試劑（低病毒參考）

2 型脊髓灰質(zhì)炎病毒的 MAPREC 分析

NIBSC 97/756

酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎細(xì)胞，消化蛋白，然后用酚和酚-氯DNA大小為100-150kb
二.甲酰胺解聚法：破碎細(xì)胞同上，然后用高濃度甲酰胺解聚蛋白質(zhì)與DNA的結(jié)合，再透析獲得DNA可得DNA200kb左右。
三.玻璃棒纏繞法：用鹽酸胍裂解細(xì)胞，將裂解物鋪于乙醇上，然后用帶鉤或U型玻璃棒在界面輕攪，DNA沉淀液繞于玻棒。生成DNA約80kb。
四.異丙醇沉淀法：基本同1法，僅用二倍容積異丙醇替代乙醇，可去除小分子RNA（在異丙醇中可溶狀態(tài)）
五.表面活性劑快速制備法：用Triton X-100A或NP40表面活性劑破碎細(xì)胞，然后用蛋白酶K或酚去除蛋白，乙醇沉淀或透析。
六.加熱法快速制備：加熱96℃-100℃，五分鐘，然后離心后取上清，可用于PCR反應(yīng)。
七.堿變性快速制備：先用NaOH作用20分鐘，再加HCI中和，離心后取上清，含少量DNA。

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